2020版中國藥典新增檢測項目——聚乙二醇分子量分布測定

新增項目

近在瀏覽國家藥典委員會網(wǎng)站的時候，驚奇的發(fā)現(xiàn)聚乙二醇300，400，1000……全部的聚乙二醇品種藥典方法都要修訂了！在瀏覽了公示方法，發(fā)現(xiàn)原來是新增了一個項目，從2020版藥典開始要標明重均分子量及分子量分布系數(shù)的標示值（按所附測定方法測定），那各位小伙伴了解分子量及分子量分布測定方法嗎？這里就給大家詳細講講。

2020版中國藥典征求意見稿之分子量及分子量分布測定方法

分別稱取聚乙二醇600、聚乙二醇1000、聚乙二醇4000、聚乙二醇7000、聚乙二醇10000分子量對照品適量，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為對照品溶液。稱取樣品適量，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液作為供試品溶液。照分子排阻色譜法（通則0514）測定，采用適宜分離范圍的凝膠色譜柱，以0.1mol/L硝酸鈉溶液（含0.02%抑菌劑）為流動相，示差折光檢測器；檢測器溫度35℃，柱溫35℃，取對照品溶液各100μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，由GPC軟件計算回歸方程，線性相關系數(shù)R應不得小于0.99。取供試品溶液100μl，同法測定，根據(jù)回歸方程計算供試品的重均分子量及分子量分布。供試品的重均分子量應為標示值的90%～110%，分布系數(shù)應為產(chǎn)品標示值的90%～110%。

什么是分子排阻色譜法

分子排阻色譜法是根據(jù)待測組分的分子大小進行分離的一種液相色譜技術。分子排阻色譜法的分離原理為凝膠色譜柱的分子篩機制。色譜柱多以親水硅膠、凝膠或經(jīng)過修飾的凝膠如葡聚糖凝膠（Sephadex）和瓊脂糖凝膠（Sepharose）等為填充劑，這些填充劑表面分布著不同孔徑尺寸的孔，藥物分子進入色譜柱后，它們中的不同組分按其分子大小進入相應的孔內(nèi)，大于所有孔徑的分子不能進入填充劑顆粒內(nèi)部，在色譜過程中不被保留，早被流動相洗脫至柱外，表現(xiàn)為保留時間較短；小于所有孔徑的分子能自由進入填充劑表面的所有孔徑，在色譜柱中滯留時間較長，表現(xiàn)為保留時間較長；其余分子則按分子大小依次被洗脫。

分子排阻色譜法應用案例

月旭科技Xtimate® SEC色譜柱是硅膠基質(zhì)的分子排阻色譜柱，其色譜填料為高純度、具有良好穩(wěn)定性的硅膠微球表面鍵合親水性聚合物。月旭科技采用特殊的表面修飾技術，確保了該填料具有良好的穩(wěn)定性和批次重現(xiàn)性。

Xtimate® SEC色譜填料采用*的化學鍵合技術，在硅膠表面鍵合了親水性聚合物以及親水性二醇基官能團，雙重鍵合機制使水溶性高分子聚合物蛋白、生物酶、多肽等生物樣品的非特異性吸附極小，因而可廣泛應用于水溶性聚合物及生物大分子的分離和測定。

月旭科技采用Xtimate® SEC-300 （7.8*300mm，5μm）兩根色譜柱串聯(lián)的方式成功分離檢測聚乙二醇40k，20k，12k，5k含量。

色譜柱：月旭Xtimate® SEC-300 （7.8*300mm，5μm）兩根色譜柱串聯(lián)

流動相：高純水

檢測波長：示差檢測器

柱溫：柱溫40℃，檢測器40℃

流速：1.0ml/min

進樣量：20μl

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