穩(wěn)定的pH環(huán)境在HPLC檢測(cè)中的重要性

在液相色譜中，經(jīng)常會(huì)在流動(dòng)相中加入緩沖溶液，其目的之一就是使整個(gè)HPLC系充處理一個(gè)穩(wěn)定的化學(xué)環(huán)境，從而使檢測(cè)具有更好的重現(xiàn)性。若系統(tǒng)的pH不夠穩(wěn)定，則會(huì)出現(xiàn)保留時(shí)間漂移，多次檢測(cè)保留時(shí)間不能重現(xiàn)，多組分出峰順序，峰組成不一致等等的各種問題。

特別是酸堿性成分的檢測(cè)，pH值對(duì)其保留與峰型都有很大的影響，因此，這些成分檢測(cè)時(shí)，HPLC系統(tǒng)的pH穩(wěn)定性就非常的重要，需在流動(dòng)相中加入相應(yīng)的緩沖鹽來保持系統(tǒng)的穩(wěn)定性。例如我們平常使用的鹽例如磷酸在1.5-3.5的pH范圍內(nèi)，有比較好的緩沖能力。

實(shí)例：

某成分原流動(dòng)相僅使用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值，但并未加緩沖鹽體系，因HPLC系統(tǒng)的pH值不夠穩(wěn)定，而導(dǎo)致的樣品檢測(cè)時(shí)某一個(gè)峰產(chǎn)生漂移，多次實(shí)驗(yàn)，結(jié)果不能重現(xiàn)的問題。

圖1：流動(dòng)相中沒有緩沖溶液，系統(tǒng)pH值不穩(wěn)定

圖2：在流動(dòng)相中加入緩沖鹽，使系統(tǒng)pH保持穩(wěn)定