液相色譜方法開發中紫外吸收波長的選擇

1、不光考慮目標物的最大吸收波長，同時要考慮樣品干擾物吸收值最小的波長。

2、飽和烴類以及其氨基或氰基衍生物是僅有的一類wan全不適合UV檢測的有機化合物。

3、被特定基團（-O-、-OH、-Cl、-COOH、-COOR）取代的飽和烴類具有臨界吸收值，可能需在短波長處（185-210nm）檢測。

4、除上述幾類化合物外，一般化合物都能在較長波長（>210nm）檢測。下表列出各種官能團的最大波長與摩爾吸收系數。

5、流動相組分的紫外本底吸收。此項考慮涉及到溶劑的種類選擇、流動相pH選擇以及流動相緩沖鹽選擇等。有些酸有紫外本底，如甲酸，乙酸；有些沒有，如磷酸。這樣，在使用較低波長檢測的方法時，就要考慮使用紫外本底小的酸。冰醋酸在短波長檢測下應該慎用。水在180nm以上實際無吸收，可忽略其影響。正相色譜所用溶劑的吸收度通常更強，所以一般需在長波長檢測。

6、最大吸收波長λmax與化學結構的關系。紫外光譜提供了分子中生色團和助色團的信息，目前雖不能精確計算紫外特征吸收峰，但已總結出各種經驗規則。最早提出的Woodward（伍德沃德）和Fieser（費塞爾）規則可用來估算二烯烴，多烯烴及共軛烯酮類化合物的最大紫外吸收波長。